Mètodes microbiològics per a estudi d'aigua, terra i aire

Microorganismes - diminutes criatures, majoritàriament unicel·lulars, que són molt estès a la natura. Es troben en tots els mitjans (aire, sòl, aigua) en humans i animals, a les plantes.

la diversitat qualitativa i nombre d'organismes depenen principalment de compostos nutricionals. Però també és important com humitat, temperatura, ventilació i l'acció de la llum solar i altres factors.

природных сред позволяют выявить наличие патогенных микроорганизмов, определить их количество и, в соответствии с полученными результатами, выработать меры по устранению или предупреждению инфекционных заболеваний. Els mètodes per a mitjans naturals sanitari i estudis microbiològics poden detectar la presència de patògens i per determinar la seva quantitat, d'acord amb els resultats obtinguts, per a desenvolupar mesures per eliminar o prevenir les malalties infeccioses. A més, es necessita compte quantitatiu per a la modelització d'ecosistemes i el desenvolupament dels processos naturals de la governabilitat. . Considerem a més quins són els mètodes d'examen microbiològic.

sòl

És considerat pels estudiosos com una de les possibles vies de transmissió de patologies infeccioses. Amb secrecions pacient humà o animal en els patògens de penetració del sòl. Alguns d'ells, en particular, d'espores, poden persistir en el sòl durant molt de temps (de vegades durant dècades). позволяют определить "микробное число" (кол-во микроорганизмов в грамме грунта), а также коли-индекс (количество кишечных палочек). El sòl de la caiguda patògens tals infeccions perilloses com el tètanus, àntrax, el botulisme, i així successivament. Mètodes d'estudi sanitari i microbiològic del sòl permeten definir "recompte microbià" (el nombre de microorganismes en el sòl d'un gram), i l'índex coli (el nombre d'E coli) .

Anàlisi de sòl: una visió general

следует в первую очередь отнести прямое микроскопирование и посев на плотную питательную среду. Els mètodes per a l'examen microbiològic del sòl s'han d'atribuir principalment microscòpia i cultiu directe en sòlid mig nutrient. Les poblacions de microorganismes i els seus grups que habiten a terra, difereixen en la situació taxonòmica i funcions ecològiques. En la ciència, estan units sota el terme genèric "biota del sòl." Primer - hàbitat gran nombre de microorganismes. En gram de sòl està present d'1 a 10 mil milions de dolars les seves cèl·lules. En aquest entorn, es porta activa la descomposició de la matèria orgànica, amb la participació de diversos microorganismes sapròfits.

Els estudis microscòpics de mètode microbiològic: els passos

L'anàlisi del medi comença amb el mostreig. Amb aquesta finalitat, prèviament pelades i ratllades ganivet d'alcohol (pala es pot utilitzar). Després d'això, la preparació de la mostra. El següent pas - el recompte de cèl·lules frotis tenyits. Penseu cada etapa per separat.

mostreig

En l'anàlisi dels sòls agrícoles tendeixen mostra presa d'una profunditat de tota la capa. Primer eliminat 2-3 cm per sobre del terra, ja que pot estar present en una microflora estranya. A partir de llavors, amb una superfície de sòl estudiat prendre monòlits. La longitud de cada un d'ells ha de complir amb el gruix de la capa des de la qual es vol mostrejar.

En una parcel·la de 100-200 sq. 7-10 m mostres seleccionades. El pes de cada - de l'ordre de 0,5 kg. Les mostres s'han de barrejar bé a la borsa. Després prendre la mostra mitjana un pes aproximat d'1 kg. Ha de ser col·locat en el paquet de pergamí (estèril) tancada en una bossa de tela. Abans de l'anàlisi de la mostra emmagatzemada a la nevera dirigir.

Preparació de la inspecció

El sòl es va agitar va abocar el vidre sec. La seva pre-netegi amb alcohol i cremar per sobre del cremador. Amb un sòl espàtula barreja a fons i ampliat de manera uniforme. És obligatori per eliminar les arrels i altres elements estranys. Per això, utilitzeu pinces. Abans de pinces i espàtula d'operació per sobre del cremador es cala foc a fresc.

De les diverses parcel·les de sòl distribuïdes en el cristall, seleccionat petites porcions. Es van pesar en un plat de porcellana en una escala tècnica. является специальная обработка образца. mètode microscòpic pas obligatori d'estudis microbiològics és el processament especial de la mostra. 2 ha d'estar preparat amb antelació, flascó estèril. La seva mida no ha de superar els 250 ml. Un dels matrassos s'aboca en 100 ml d'aigua de l'aixeta. A causa de que pren 0,4-0,8 ml de mostra líquida de sòl i s'humiteja a una pasta. La barreja s'ha de fregar amb un dit o cautxú mà de morter durant 5 minuts.

L'aigua de la primera matràs es transfereix a la massa de sòl matràs de buit. A més, fregant la seva esquena. Després d'aquesta massa es transfereix a un matràs prop de la flama del cremador. Contenidor amb suspensió de sòl es va agitar en un agitador durant 5 minuts. A partir de llavors, es va deixar sedimentar durant aproximadament 30 segons. Això és necessari per tal de permetre que les partícules grans s'assentin. Després s'utilitza una massa mitjana minuts per preparar la preparació.

Els recomptes de cèl·lules en frotis fixos

, разработанному Виноградским. estudi microscòpic directe del sòl es porta a terme pel mètode dels estudis microbiològics, desenvolupat Vinogradskii. En certa volum de la suspensió es va comptar el nombre de cèl·lules de microorganismes. L'estudi de frotis fixos pot emmagatzemar medicaments en el llarg termini i realitzar càlculs en qualsevol moment.

Preparació del fàrmac com segueix. Una certa quantitat de suspensió (típicament 0,02-0,05 ml) s'aplica amb una micropipeta sobre el portaobjectes. A aquesta solució es va afegir una gota d'agar-agar (polisacàrid agaropectina barreja i agarosa extreu d'algues brunes i vermelles mar Negra), es va agitar ràpidament i es va estendre sobre una àrea 4-6 sq. cm. assecats a l'aire Pap i fixa durant 20-30 minuts. alcohol (96%). A continuació, el fàrmac es va humitejar amb aigua destil·lada i col·locat al p-p carbólico eritrosina 20-30 min.

Després de la tinció, es renta i s'asseca en aire. Els recomptes de cèl·lules realitzen des de la lent d'immersió.

Sembra en mitjans sòlids

позволяют выявить большое количество микроорганизмов. mètodes microscòpics per a examen microbiològic poden detectar un gran nombre de microorganismes. Però tot i això, el mètode de inoculació és el més comú en la pràctica. La seva essència consisteix en la sembra de la quantitat del medicament (suspensió de sòl) en una placa de Petri en un medi sòlid.

позволяет учитывать не только количество, но и групповой, а в ряде случаев и видовой состав микроскопической флоры. Aquest mètode d'investigació microbiològica té en compte no només la quantitat sinó també el grup, i en alguns casos, i la composició d'espècies de la flora microscòpiques. Comptar el nombre de colònies produïdes, generalment de la part inferior de la placa de Petri a la llum transmesa. A l'àrea calculada col·locat un punt d'interès o tinta.

Anàlisi de l'aigua

La microflora del cos d'aigua, com a regla general, reflecteix la composició microbiana del sòl al seu voltant. имеют особое практическое значение при изучении состояния конкретной экосистемы. En aquest context, els mètodes d'anàlisi sanitari i microbiològic d'aigua i el sòl són de particular importància pràctica en l'estudi de l'estat d'un ecosistema particular. L'aigua fresca conté, per regla general, cocos, bacteris en forma de barra.

Anaerobis en aigua que es troben en petites quantitats. Com a regla, es multipliquen a la part inferior dels cossos d'aigua, en el fang, prenent part en el procés de purificació. oceans la microflora i mars avantatjosament representats bacteris halòfiles (halòfiles).

A l'aigua, pous artesians són pràcticament no hi ha microorganismes. Això és degut a la capacitat de filtració de la capa de sòl.

считаются определение микробного числа и коли-титра либо коли-индекса. Els mètodes convencionals d'investigació microbiològica de l'aigua consideren la definició d'índex si-microbiana i coli-títol o. El primer indicador defineix el nombre de bacteris en 1 ml de líquid. índex Coli representa el nombre de coliformes presents en un litre d'aigua, i si el títol de - el nombre mínim o màxim líquid de dilució en el qual encara poden ser detectats.

Determinació del nombre de microbis

Aquest mètode sanitari examen microbiològic d'aigua és com segueix. En 1 ml d'aigua es determina el nombre de anaerobis mesòfils i facultatius (Intermedi) aerobis capaç d'en agar carn-peptona (mig primari) a 37 ° C. durant el dia per formar colònies visibles amb un augment de 2-5 pàg. o l'ull nu.

является посев. El pas clau del mètode d'anàlisi microbiològica d'aigua es sembra. A causa de que cada mostra es sembra almenys 2 volums diferents. Quan l'anàlisi de l'aigua de l'aixeta a cada tassa és de 1-0,1 ml de líquid pur i contaminat 0,01-,001 ml. Per a la inoculació de 0,1 ml o menys volum de fluid es dilueix amb aigua destil·lada (estèril). Consistentment preparar dilucions decimals. 1 ml de cada un d'ells es realitzen en dues plaques de Petri.

La criança plena d'agar nutritiu. Primer ha de fondre, i refredar a 45 graus. Després d'agitar, el medi actiu es deixa sobre una superfície horitzontal per a la solidificació. A 37 graus. cultius es produeixen durant tot el dia. позволяет учитывать результаты на тех чашках, где количество колоний находится в пределах от 30 до 300. El mètode considerat de la investigació microbiològica de l'aigua té en compte els resultats d'aquests plats on el nombre de colònies en l'interval de 30 a 300.

aire

Es considera una planta de trànsit per als microorganismes. являются седиментация (оседание) и аспирация. Els principals mètodes d'estudis microbiològics són la sedimentació d'aire (sedimentació) i l'aspiració.

ambient d'aire microflora es divideix arbitràriament a variable i constant. El primer grup inclou llevats, cocos cromogènic, espora de Bacillus coli i altres microorganismes que són resistents a assecat, exposició a la llum. Representants de la microflora variables, que penetren en l'aire del seu hàbitat habitual, conserven sempre la seva vitalitat.

En l'aire de les grans ciutats microorganismes en molt més que a l'entorn de l'aire de les zones rurals. A través dels mars, els boscos són molt pocs bacteris. purificació de l'aire facilitar la precipitació: neu i la pluja. Interior microbis molt més que en espais oberts. El seu nombre s'incrementa en l'hivern en l'absència de ventilació regular.

sedimentació

считается простейшим. Aquest mètode d'investigació microbiològica en microbiologia es considera que és el més simple. Es basa en la sedimentació de les gotetes i les partícules en la superfície de l'agar en una placa de Petri oberta sota la gravetat. mètode de sedimentació pot no determinar amb precisió el nombre de bacteris en l'aire. El fet és que en una tassa oberta per agafar la fracció fina de les partícules de pols i gotetes d'bacteriana bastant difícil. A la superfície retingut partícules principalment grans.

Aquest mètode no s'utilitza per a l'anàlisi d'aire. Aquest entorn es caracteritza per grans fluctuacions en la velocitat del flux d'aire. La sedimentació pot, però, utilitzar-se en absència de dispositius més sofisticats o font d'energia elèctrica.

Determinació del nombre de microbiana realitzat pel mètode de Omelyansky. De conformitat amb això, durant 5 minuts sobre una superfície de 100 agar quadrat. cm s'instal·la un nombre de bacteris és present en 10 litres d'aire.

Ordenar 535 "Sobre la unificació de mètodes microbiològics d'investigació"

Anàlisi bacteriològica ocupa un lloc important en les activitats clíniques i de laboratori complexos dirigits al diagnòstic, prevenció i tractament de diverses malalties infeccioses. No obstant això, l'estudi del medi ambient, que no estan limitats.

De particular importància és l'anàlisi bacteriològica de material biològic en els hospitals. Per a la investigació duta a terme en els centres de salut, l'augment dels requisits. El propòsit de l'Ordre "en la unificació dels mètodes microbiològics d'investigació" és millorar l'anàlisi bacteriològica, la millora de la qualitat i eficiència de diagnòstic microbiològic.

L'examen microscòpic de frotis en dones

És un mètode de clau d'anàlisi per al diagnòstic d'infeccions, infeccions de transmissió sexual, i infeccions oportunistes (bacteris oportunistes).

L'anàlisi microscòpic per avaluar la composició qualitativa i quantitativa de la microflora, comprovar la correcció de mostreig. Per exemple, la presència d'epiteli vaginal en frotis presos del canal cervical indica una violació de les regles de selecció d'una mostra biològica.

Es diu que l'examen microbiològic en aquest cas generalment és seguit per alguns problemes. Estan relacionats amb el fet que en el tracte genital inferior està normalment presenti una microflora divers que varia a diferents edats. Per millorar l'eficiència de la investigació i han desenvolupat normes estandarditzades.

El diagnòstic de les infeccions virals

Es porta a terme per mètodes de detecció d'ARN i ADN patògens. Ells es basen principalment en la determinació de seqüències de nucleòtids en material patològic. Amb aquesta finalitat, les sondes moleculars. Es produeixen artificialment àcids nucleics complementaris a (complementària a) els àcids virals marcades amb un marcador radioactiu o biotina.

La peculiaritat del mètode es repeteix copiar el fragment d'ADN específic que conté uns pocs centenars de (o desenes de) el nucleòtid parells. replicació (còpia) és que l'extensió pot començar només en certes unitats. encebadors (primers) utilitzats per crear-los. Són oligonucleòtids sintetitzats.

PCR de diagnòstic (reacció en cadena de la polimerasa) és simple en execució. Aquest mètode li permet obtenir ràpidament el resultat mitjançant l'ús d'una petita quantitat de material patològic. Usant PCR de diagnòstic identifica infeccions latents (ocults) aguda, crònica i.

Quan es considera més preferible la sensibilitat d'aquest mètode. No obstant això, els sistemes de proves actuals no són prou fiable, per la qual cosa el diagnòstic per PCR no pot substituir completament als mètodes tradicionals.